導讀：肝內膽管癌（ICC） 是一種預後不良的侵襲性惡性腫瘤。環狀RNA和SUMO化在ICC發展中的潛在功能和機制仍然知之甚少。
近日，浙江大學團隊在《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》期刊發表的最新研究成果“Circ-RAPGEF5 promotes intrahepatic cholangiocarcinoma progression by stabilizing SAE1 to facilitate SUMOylation”，研究發現Circ- RGEF55穩定SAE1，從而促進ICC腫瘤進展和SUMO化。標靶Circ-RAPGEF5 或SAE1 可能是ICC 的一種新型診斷和治療策略。
研究背景
01
肝內膽管癌（ICC）是一種惡性腫瘤，起源於肝膽管的上皮細胞。肝細胞癌是最常見的原發性肝癌類型，其次是ICC，佔所有原發性肝癌的10%-15%。近年來，ICC的發生率顯著增加。儘管ICC的診斷和治療取得了進展，但由於腫瘤侵襲性早、復發率高且有遠端轉移傾向，該疾病仍是一種預後較差的具有挑戰性的疾病。因此，識別新的分子標靶對於更好地了解ICC的發病機制和腫瘤進展至關重要。
環狀RNA是一類非編碼RNA，其特徵在於其獨特的環狀結構，由前mRNA的外顯子或內含子的反向剪接產生。與線性RNA相比，這些特殊的結構使其對核酸核酸外切酶具有抗性，並賦予更高的穩定性。環狀RNA在腫瘤發生中起著至關重要的作用。環狀RNA具有多種關鍵調控功能，包括充當microRNA（miRNA）和蛋白質的分子海綿以調節轉錄，幹擾前mRNA正常剪接以調節宿主基因mRNA翻譯，以及形成環狀RNA-蛋白質複合物以與mRNA競爭蛋白質結合。最近的研究還表明，環狀RNA可以作為編碼功能性小肽的模板，從而調節基本的生物過程，如代謝重編程，腫瘤細胞增殖和侵襲性。環狀RNA具有穩定和保守的性質。因此，環狀RNA作為腫瘤診斷和預後的可靠生物標記具有巨大潛力，可能是腫瘤學中很有前景的治療標靶。最近的許多研究進一步強調了環狀RNA作為新型調節RNA分子在ICC發展中的關鍵作用。
在這項研究中，我們發現了一種新的環狀RNA，Circ-RAPGEF5（hsa_circ_0001681），它在ICC中顯著上調，並且與患者的低存活率相關。我們的研究結果揭示了涉及Circ-RAPGEF5的先前未知的監管機制，並表明其作為ICC治療標靶的潛力。我們的研究表明，Circ-RAPGEF5透過增強ICC細胞內的SUMO化來促進ICC細胞的增殖，遷移和侵襲。性功能障礙專區 勃起功能專區 克制敏感度專區 催情春藥專區
印度學名藥專區 迷幻昏睡專區 延時噴霧專區 陰莖增大專區從機制上講，Circ-RAPGEF5充當miR-3185的海綿來增加SAE1，SAE5是參與SUMO化的主要蛋白質。此外，Circ-RAPGEF5可以增強AKT SUMO化，導致ICC的腫瘤發生和進展。
Circ-RAPGEF5促進ICC體外增殖和轉移
02
我們設計並合成了兩種專門用於Circ-RAPGEF5反向剪接位點的siRNA（Si-Circ-RAPGEF1#5和Si-Circ-RAPGEF2#5），並成功建構了Circ-RAPGEF5過度表現質粒。
將兩種針對Circ-RAPGEF5和Circ-RAPGEF5過度表現質粒的siRNA轉染至RBE和CCLP1細胞。當Circ-RAPGEF5被敲低時，宿主基因的mRNA和蛋白質表現RAPGEF5保持不變。透過qRT-PCR驗證了Circ-RAPGEF5敲低和過度表現的有效性。CCK-8、EdU標記和集落形成測定表明，Circ-RAPGEF5沉默顯著抑制了RBE和CCLP1細胞的細胞增殖，而Circ-RAPGEF5過度表現則產生了相反的效果。細胞週期流式細胞儀顯示，Circ-RAPGEF2的下調抑制了細胞週期的G5向S轉變。然而，Circ-RAPGEF1過度表現顯著降低了G5/G0期細胞的數量，並顯著增加了S期細胞的數量。細胞凋亡檢測表明，賽倍達Spedra效果 賽倍達Spedra作用 賽倍達Spedra成分 賽倍達Spedra官網 賽倍達Spedra評價 賽倍達Spedra多少錢 賽倍達Spedra藥局購買 正品賽倍達Spedra 賽倍達Spedra吃法 賽倍達Spedra 50mg 賽倍達Spedra 100mg 賽倍達Spedra200mg
轉染RBE和CCLP1細胞的siRNA凋亡率顯著提高。相反，Circ-RAPGEF2過度表現後ICC細胞的凋亡率顯著降低。此外，入侵和遷移能力測試使用跨孔測定表明，Circ-RAPGEF2的缺失顯著損害了ICC細胞的遷移和侵襲，而Circ-RAPGEF2的過度表現增強了這種能力。
Circ-RAPGEF5對體外增殖和侵襲的影響
研究結論
03
總之，我們發現了環狀RNA調節SUMO化以促進ICC腫瘤進展的新機制。我們證明了Circ-RPAGEF5上調與ICC患者的預後不良有關。我們進一步發現，Circ-RAPGEF5競爭性結合miR-3185以穩定SAE1降解，促進整體AKT SUMO化，並誘導腫瘤增殖和遷移。
